2022-39
ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,用于對液體樣本中的目標物質進行定性和定量檢測。隨著國家對科研項目的重視,在科研單位和廣大科研類院校也越來越受歡迎。ELISA試劑盒之所以受歡迎和它自身的優(yōu)點是分不開的。首先適合檢測的樣本很廣泛包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,具體根據(jù)試劑盒說明書決定,通常檢測靈敏度比較高。其次ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應的...
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2022-38
24、培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎?首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細菌污染。25、如何預防細胞培養(yǎng)中黑點的產(chǎn)生?掌握細胞傳代的最佳時機,不要...
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2022-37
①保存血清最好方法是什么?我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。但是若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臒o菌容器內,再放回冷凍。反復凍融會對血清的品質造成不良影響。②如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損?我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。③血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清在解凍過程(包括沒有*解凍)或儲存在2-8℃時,血清中的各...
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2022-34
經(jīng)費不是很充足,但是用量也蠻大,怎么選血清這個是最多的一個群體,有些老師有錢,但是這個錢也是自己辛辛苦苦取得的,所以我覺得可以考慮一些小品牌,但是小品牌不代表是假貨,不代表是國產(chǎn),也不代表是假洋品牌。買的初期,需要去多找?guī)讉€牌子的試用裝同時測試。教你一眼判斷血清的質量淡黃色,透明——2小時以內的國產(chǎn)新生牛血清,膽紅素含量較少;金黃色,透明——產(chǎn)下較長時間的新生牛血清,一般超過2小時了;金黃色,不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;淡黃色,帶一點微紅,透明——等級高的進口胎牛血清...
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2022-33
WinSeran細胞培養(yǎng)常見兩個問題(抱團+空泡問題)細胞抱團怎么處理?一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。細胞內有空泡,是否是正常...
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2022-32
如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?原則上:直接滅菌后丟棄之。當重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如霉素b和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。1.在無抗生素的培養(yǎng)基...
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2022-31
黑點已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進行處理?如果判定黑點是污染,請及時將細胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進行:如果是懸浮細胞:收集細胞上清慢速離心(500-600rpm/min,5-6min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細胞:將細胞用PBS洗2-3遍,洗的時候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1min左右,讓細胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細胞,將收集的細胞懸液慢速離心(500-600rpm...
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2022-224
1、一般拿到細胞后,應該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各兩張),排除細胞本身污染的情況。2、何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。3、細胞何時進行傳代較好?一般情況下細胞生長至*匯合后就應該傳代,所有細胞生長都有一個要求不宜...
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