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耐藥細(xì)胞株是如何構(gòu)建的？

目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法主要有以下幾種：大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因結(jié)合藥物篩選法。其中藥物濃度遞增法和大劑量藥物沖擊法成為臨床建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型的常用方法。①藥物濃度遞增法是指最初使用低濃度的藥物刺激細(xì)胞，等待細(xì)胞適應(yīng)低濃度的環(huán)境之后，再略微提高藥物濃度，繼續(xù)等待細(xì)胞適應(yīng)目前的環(huán)境，經(jīng)過反復(fù)的培養(yǎng)和加壓，最終使細(xì)胞可以在高濃度的藥物環(huán)境下生存②大劑量藥物沖擊法是在細(xì)胞培養(yǎng)時加入超高藥物濃度的藥物，但是孵育的時...

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如何養(yǎng)出“漂亮“的懸浮細(xì)胞？

實驗室培養(yǎng)的細(xì)胞種類可以大致分為貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞兩種，只有極少數(shù)類型細(xì)胞同時存在兩種狀態(tài)。懸浮細(xì)胞是指不需要依賴支持物，可在培養(yǎng)基中以懸浮狀態(tài)生長的一類細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞和大部分血液系統(tǒng)來源細(xì)胞。（如小鼠白血病細(xì)胞WEHI-3,人白血病細(xì)胞K-562,HL-60）。工業(yè)上也有越來越多的貼壁傳代細(xì)胞被馴化出來，進(jìn)行全懸浮的培養(yǎng)。目前在工業(yè)中應(yīng)用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293細(xì)胞等，它們主要用于重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)；在獸用生物制品中常用的傳代細(xì)胞主要有采用全懸...

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什么是細(xì)胞支原體污染？怎么辦？

支原體污染一直是細(xì)胞培養(yǎng)的“頭號敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請自來”總是讓我們措手不及。世界上有近60%的實驗室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識這個“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡單，具有高度多形性、無細(xì)胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點。除此之外，它的“個頭”很小，只有0.1-0.3um，可通過一般的濾菌器。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒。大部分支原體繁殖速度比細(xì)菌慢，適宜生...

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炎炎夏日，細(xì)胞又污染了怎么辦？

一、單細(xì)菌污染?1.檢查操作人員的無菌操作技術(shù)；2.檢查相關(guān)培養(yǎng)基與試劑是否為操作者個人專用；3.檢查操作者的清潔情況：（a）培養(yǎng)操作前后是否洗手；（b）是否更換實驗服；（c）是否扎好頭發(fā)；4、進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時是否嚴(yán)格按照無菌要求佩戴實驗服具（包括實驗服、口罩、防塵帽、手套等）；5、若污染反復(fù)出現(xiàn)，問題往往出自使用試劑，需立即進(jìn)行檢查。二、支原體污染怎么辦?1、與其他操作者一起檢查支原體污染，確認(rèn)篩選步驟是否具有可操作性；2、確認(rèn)使用的血清是否為嚴(yán)格過濾，確保其質(zhì)量；3、外來細(xì)...

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如何構(gòu)建體外耐藥細(xì)胞

近年來，惡性腫瘤（癌癥）已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一。為什么癌癥容易復(fù)發(fā)，很難治愈呢？因為絕大部分抗腫瘤藥物，最終都逃不過腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的命運，導(dǎo)致癌癥繼續(xù)發(fā)展。對于腫瘤細(xì)胞耐藥的產(chǎn)生原因仍然處在研究之中，如何改善腫瘤細(xì)胞對化療藥物耐藥依然是目前研究的熱點和難點。什么是耐藥性？化療是治療惡性腫瘤的方法中有效的手段之一，指用化學(xué)藥物的方法殺死腫瘤細(xì)胞。常用的藥物包括細(xì)胞增殖的抑制劑、DNA損傷修復(fù)途徑的抑制劑，如阿霉素（adriamycin）、紫杉醇（...

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WinSera胎牛血清搞活動了

8月1日至9月30日，WinSera優(yōu)等胎牛血清的優(yōu)惠來襲，一次性購買多瓶有好禮相送，歡迎大家選購?；顒釉斍檎埪?lián)系千舍銷售~~胎牛血清的常見問題Q血清應(yīng)該如何保存，可以存放多久？A:血清可長期儲存于-20℃冰箱中。倘若把血清存放在4℃冰箱，請不要超過一個月。如果一次性無法用完一瓶血清，建議將血清無菌條件下分裝并儲存于-20℃，避免反復(fù)凍融。Q如何正確地解凍血清？A:采用逐步解凍法，將血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)入4℃冰箱融解，隨后分裝。切忌直接將血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)移至室溫解凍，這樣...

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血清保存方法和凍融方法

血清保存方法1.如何保存血清？血清應(yīng)該在-20℃保存。如果一次無法用完一瓶，應(yīng)該無菌分裝后冷凍保存。注意避免反復(fù)凍融。2.為什么儲存在冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀？有些胎牛血清產(chǎn)品沒有預(yù)老化，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在－20℃儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。凍融方法正確解凍方法：將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時，使之緩慢部分溶解，然后再放在室溫下使之全溶。注...

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胎牛血清與新生牛血清、小牛血清區(qū)別

胎牛血清與新生牛血清、小牛血清區(qū)別1.血清類別牛血清類別胎齡胎牛血清（FBS)胎兒(母牛懷孕3-8個月)新生牛血清(NCS)出生10日內(nèi)小牛血清（BCS）16-22周供體血清成年牛2.采血方式不同胎牛血清：母牛懷孕3-8個月時，采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清：分別是取自新生牛（小牛）、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清還未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分最少；促細(xì)胞生長因子、促帖附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分也不同于其他幾類血清4....

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