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SBI無(wú)外泌體血清|EXO-FBS-50A-1現(xiàn)貨
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

SBI無(wú)外泌體血清|EXO-FBS-50A-1現(xiàn)貨
貨號(hào):EXO-FBS-50A-1
規(guī)格:50ml
外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。1983年,外泌體綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn), 1987年Johnstone將其命名為“exosome"。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶

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更新時(shí)間:2023-12-21

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SBI無(wú)外泌體血清|EXO-FBS-50A-1現(xiàn)貨

產(chǎn)品名稱:去除無(wú)外泌體血清

貨號(hào):EXO-FBS-50A-1

品牌:SBI

規(guī)格:50ml

當(dāng)外泌體在1980年被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來(lái)源的外泌體參與到腫瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)與侵襲。

外泌體.jpg


外泌體大家應(yīng)該都很熟悉。1983年,在綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中第一次發(fā)現(xiàn)了現(xiàn)在生物學(xué)研究領(lǐng)域炙手可熱的“小網(wǎng)紅"——一種特殊囊泡結(jié)構(gòu),并與1987年正式被命名為“exosome"。

外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。為細(xì)胞間通訊的重要媒介,它像一個(gè)信使,為細(xì)胞與胞外環(huán)境傳遞信息,保障機(jī)體的正常工作。

越來(lái)越多的科研人員投入到外泌體的研究中,根據(jù)PubMed統(tǒng)計(jì)顯示,最近幾年,外泌體研究呈爆炸增長(zhǎng)。

外泌體的研究離不開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)。以腫瘤相關(guān)外泌體研究為例,目前,收集腫瘤細(xì)胞外泌體主要有兩種方法:

方法一

使用正常培液養(yǎng)細(xì)胞再換無(wú)血清培液收外泌體。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培養(yǎng)基用于培養(yǎng)細(xì)胞收外泌體。

首先,就是基本的離心條件了,目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了,這兩家超離在行業(yè)內(nèi)算是翹楚了。其次就是離心參數(shù)了:120000 g,4℃,離心14h,離心結(jié)果如圖:

11.jpg


1:離心后,血清外泌體會(huì)富集在管底和管壁;

2:吸取血清時(shí),只吸取澄清部分的血清,并且遠(yuǎn)離上圖中標(biāo)記的區(qū)域;

3:吸取70-80%的澄清的血清;(注意:動(dòng)作慢,動(dòng)作輕)

4:其余的渾濁血清留作正常細(xì)胞的的營(yíng)養(yǎng)物添加使用,避免浪費(fèi)。

5:如果覺(jué)得純度不夠,再把離心后收集的血清做二次超速離心。

6:針對(duì)超速離心后的血清,必須進(jìn)行粒徑檢測(cè)(離心前樣品和離心后樣品),該數(shù)據(jù)可以放到文章補(bǔ)充材料中,用來(lái)證明無(wú)血清外泌體制備成功。

WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目錄如下:

WINSERA®胎牛血清

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優(yōu)級(jí)

FBS500-WS-002

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FBS500-WP-002

500ML

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ES級(jí)別

FBS500-WE-002

500ML

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無(wú)外泌體血清

FBS050-EXO

50ML

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人膽囊上皮細(xì)胞永生化+GFP

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人原代甲狀旁腺主細(xì)胞永生化

人原代乳腺上皮細(xì)胞永生化

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豬外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)永生化

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兔子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化

兔肝臟間質(zhì)細(xì)胞永生化

SBI無(wú)外泌體血清|EXO-FBS-50A-1現(xiàn)貨胎牛血清(FBS)已在真核細(xì)胞培養(yǎng)中使用了幾十年了。然而,很少有人關(guān)注FBSRNA對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生什么樣的生物學(xué)效應(yīng)。來(lái)自哈佛醫(yī)學(xué)院的研究人員用RNA測(cè)序,證明了FBS含有蛋白質(zhì)編碼和調(diào)控的多種RNA,包括mRNAmiRNA、rRNAsnoRNA等。它們中的大多數(shù)(>70%)仍然存在于細(xì)胞外囊泡(EV)和細(xì)胞間通訊研究中常使用的長(zhǎng)時(shí)間超速離心得到的無(wú)囊泡FBSvesicle-depleted FBS, vdFBS)中。FBS相關(guān)的RNA會(huì)在分離細(xì)胞外膜泡RNAexRNA)時(shí)一同被分離出來(lái),這會(huì)對(duì)下游RNA分析造成干擾。許多進(jìn)化上保守的FBS源的RNA種類會(huì)被錯(cuò)誤地認(rèn)為是人或小鼠細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄本。值得注意的是,在FBS中含量豐富的一些miRNAs,如miR-122、miR-451AmiR-1246,先前已被報(bào)道為在培養(yǎng)細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞外膜泡中富含的miRNAs,這可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。對(duì)公開(kāi)可用的exRNA數(shù)據(jù)庫(kù)的分析支持FBS污染的概念。此外,FBS轉(zhuǎn)錄本可被培養(yǎng)的細(xì)胞吸收,并影響高度敏感的基因表達(dá)譜技術(shù)的結(jié)果。因此,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程中采取減少FBSRNA干擾的預(yù)防措施是非常有必要的。



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