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特級(jí)胎牛血清|貨號(hào):0500

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品牌:ScienCell

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。

胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí),將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。

因此選擇正確的,靠譜的胎牛血清及廠家極其重要↓↓↓↓

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胎牛血清

1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。

2、蛋白質(zhì)含量 3.5%~5.0%( w/v)

3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)

4、無(wú)菌檢驗(yàn)  陰性

5、支原體檢驗(yàn)  陰性

6、細(xì)菌內(nèi)毒素 ≤5(EU/ml)

7、牛腹瀉病毒 陰性

8、大腸桿菌噬菌體 陰性

9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml

細(xì)胞倍增時(shí)間 ≤15h

克隆率 ≥85%

                     — 熱滅活 —

01

目的

血清的滅活就是將血清置于56℃作用30min,然后將它們分裝儲(chǔ)存于-20℃。熱滅活的目的是為了去除血清中的補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),以排除對(duì)免疫分析的影響。胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要。研究人員曾對(duì)商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測(cè)定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達(dá)成年動(dòng)物血清的1-3%,而其它補(bǔ)體成分僅有成年動(dòng)物的5-50%,至于補(bǔ)體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補(bǔ)體固定實(shí)驗(yàn),我們也在多個(gè)不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結(jié)果。此外,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過程,也對(duì)熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用。因此,胎牛血清在大部分的細(xì)胞培養(yǎng)中是不需要滅活的,但在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

02

負(fù)面影響

雖然熱滅活可以去除血清中的一些物質(zhì),減少免疫球蛋白的細(xì)胞毒性而不破壞多肽生長(zhǎng)因子,但同時(shí)也會(huì)對(duì)一些血清中較不穩(wěn)定的成分進(jìn)行破壞,如生長(zhǎng)因子和氨基酸。熱滅活通常會(huì)降低血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力,并且對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生(這些沉淀主要是析出的纖維蛋白以及脂蛋白),而導(dǎo)致的沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染。注意到這個(gè)現(xiàn)象后,為了驗(yàn)證污染的存在或促進(jìn)沉淀的溶解,許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育,這將會(huì)導(dǎo)致情況變得更糟,因?yàn)檠逯械牡鞍踪|(zhì)會(huì)進(jìn)一步的析出,再次破壞血清的營(yíng)養(yǎng)成分。而為了確定血清未被污染所進(jìn)行的鏡檢,無(wú)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)以及革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)更是浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)者大量的時(shí)間以及精力,給用戶以及供應(yīng)商帶來(lái)不必要的麻煩。

特級(jí)胎牛血清|貨號(hào):0500

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兔肝臟間質(zhì)細(xì)胞永生化

— 結(jié)論 —

綜上所述,除了在免疫學(xué)研究中為排除補(bǔ)體的干擾需要對(duì)血清進(jìn)行滅活外,多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)血清的熱滅活并不是必要的。我們建議,對(duì)于那些對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶,需要通過對(duì)比試驗(yàn)來(lái)證實(shí)其必要性,并確定滅活的適當(dāng)條件;此外,在滅活過程中,需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測(cè),并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。


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