neuro-2a（N2A）小鼠腦神經(jīng)瘤細胞

細胞介紹

克隆Neuro-2A是由R.J.Klebe和F.H.Ruddle經(jīng)A株白鼠的自生腫瘤建立。該細胞產(chǎn)生大量微管蛋白，此蛋白在神經(jīng)細胞中起應(yīng)答軸漿流動的收縮系統(tǒng)作用。

細胞特性

1） 來源：腦神經(jīng)母細胞瘤

2） 形態(tài)：阿米巴樣干細胞

3） 含量：>1x10^6  細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

細胞凋亡的早期形態(tài)學(xué)改變是核染色質(zhì)濃聚、固縮,聚集在核膜周邊，然后是胞漿濃縮、胞膜起泡,繼而細胞核裂解成若干碎片，細胞膜將胞質(zhì)和染色質(zhì)斷片包裹，胞漿內(nèi)形成多個膜結(jié)構(gòu)尚完整的“小泡"及 “凋亡小體" (apoptoticbody)。這不同于細胞壞死的細胞腫脹、胞膜破裂、細胞崩解。

       根據(jù)凋亡細胞固有的形態(tài)特征，至今為止，已經(jīng)設(shè)計了許多不同的細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測方法。

       一、光學(xué)顯微鏡觀察

       凋亡細胞的主要特征為核染色質(zhì)致密深染，形成致密質(zhì)塊，有時可碎裂。在HE染色的組織切片中細胞體積縮小，胞質(zhì)致密、嗜酸性染色增強，并可形成凋亡小體。在組織中凋亡細胞常以分散單個形式存在，凋亡細胞與周圍細胞分離，不引起炎癥反應(yīng)。

本方法簡便易行，但在細胞密集的組織中對于改變不典型的細胞判斷較困難，常缺乏較為特征的指標，具有較強的主觀性，重復(fù)性差。本方法可用于調(diào)亡現(xiàn)象的初步觀察，作為分析指標之一。

       檢測方法：細胞涂片或組織石蠟切片作HE染色或Giemsa染色，在高倍物鏡下觀察凋亡細胞的形態(tài)改變，結(jié)合顯微測量工具可作凋亡細胞計數(shù)。

       二、視頻時差顯微技術(shù)

       此方法用于細胞培養(yǎng)，通過相差顯微鏡可動態(tài)觀察細胞凋亡的變化過程，尤其是觀察細胞表和外形的變化。凋胞與基質(zhì)分離，胞體變圓、收縮、出泡，有的細胞拉長，出現(xiàn)釘狀突起，特續(xù)數(shù)小時后細胞膜破裂，細胞溶解，通過連續(xù)觀察，本方法可養(yǎng)壑培養(yǎng)中的凋亡細胞，但不能用于病理組織。

       檢測方法：收集2×105細胞/ml培胞，置于多孔培養(yǎng)板，加入凋亡誘導(dǎo)劑，在帶有自動攝像裝置的相差顯微鏡下觀察凋亡細胞的動態(tài)改變，每隔分鐘30秒作序列攝影，連續(xù)24小時。如同進進行熒光染色，可參熒光晃微鏡下觀察和攝影。

       三、電子顯微鏡觀察

雖然光學(xué)顯微鏡下可以看見胞膜起泡現(xiàn)象和凋亡小體,但凋亡細胞的形態(tài)學(xué)變化大多發(fā)生在超微結(jié)構(gòu),因此用光鏡觀察難以令人滿意,而透射電鏡可清楚地觀察到細胞結(jié)構(gòu)在凋亡不同時期的變化。電鏡形態(tài)學(xué)觀察是迄今為止判斷凋亡經(jīng)典、可靠的方法,被認為是確定細胞凋亡的金標準。

       缺點：

       (1)只能定性,不能定量;

       (2)標本處理過程復(fù)雜,設(shè)備相對昂貴,對檢查者的技術(shù)水平要求較高,不適于大批標本檢測;

       (3)在組織切片上進行電鏡觀察時,有時凋亡很難與正常細胞有絲分裂相鑒別,因為兩種情況下都可出現(xiàn)染色質(zhì)濃聚。如同時進行熒光染色,可彌補電鏡檢查的不足。

       檢測方法：透射電鏡標本經(jīng)戊二醛和餓酸雙重固定，丙酮脫水，環(huán)氧樹脂包埋，超薄切片，醋酸枸椽酸電子又重染色，透射電鏡觀察。掃描電鏡標本經(jīng)戊二醛和餓酸雙重固定，乙醇逐級脫水，CO2臨界點干燥，真空噴金，掃描電鏡觀察。

       四、流式細胞技術(shù)

       流式細胞儀檢測凋亡細胞是通過檢查其光射特征及熒光參數(shù)時行的。細胞穿過流式細胞儀的激光束集點時使激光發(fā)生散射，分析散射光可以提供細胞大小及結(jié)構(gòu)的信息。散射光包括前向散射光和左向角散射光兩種，前向散射光的強度與細胞大小、體積相產(chǎn)，右向角射光的強度與細胞結(jié)構(gòu)的析射性、顆粒性（granu-larity）有關(guān)。

       細胞凋亡過程中出現(xiàn)的形態(tài)改變?nèi)缂毎櫩s、胞膜起泡、核濃縮和碎裂等可以使光散射特性發(fā)生改變。早期凋亡細胞主要表現(xiàn)為前向散射光減弱而右向角散射光增強或不變，前者反映了細胞的皺縮，后者反映了細胞的核逐縮及碎裂。晚期凋亡細胞的前向散射光和右向角散射光均減弱。

       由于光散射牧場生并非凋亡細胞的特異性指標，細胞的機械性損傷和細胞壞死也可以使前向散射光減弱。因此，只有將光散射特性的檢測與熒光參數(shù)的檢測結(jié)合起來才能準確地辨認凋亡細胞。

       細胞凋亡過程中核酸內(nèi)切酶在DNA分子核小體間的降解，導(dǎo)致小分子DNA漏出，核DNA含量下降，細胞熒光染色后作流式細胞儀分析，可以發(fā)現(xiàn)在DNA直方圖上正常二倍體細胞的Go/G1峰前出現(xiàn)一個亞二倍體峰（xub-G1峰，即AP峰--apoptotic peak）,代表凋亡細胞。

       根據(jù)此亞二倍體峰可以計算凋亡細胞的百分率。此外，流式細胞術(shù)還可以通過測定線粒體膜的電位、溶酶體質(zhì)子泵的活性及細胞DNA/總蛋白質(zhì)比例等方法辨認凋亡細胞。

       檢測方法：獲取密度1×106細胞/ml左右的細胞懸液，精洗，固定，熒光染料染色，上流式細胞儀分析。

neuro-2a（N2A）小鼠腦神經(jīng)瘤細胞

小鼠神經(jīng)干細胞 NE-4C

小鼠胰島β細胞株 Min6

小鼠B細胞淋巴瘤 A20

小鼠肝癌細胞 Hepa1-6

小鼠小膠質(zhì)細胞 Bv-2

小鼠乳腺癌細胞 4T1

小鼠胚胎瘤細胞 ATDC5

小鼠胰腺癌細胞 PANC02

小鼠膠質(zhì)瘤細胞 GL261

小鼠肺癌細胞 LLC

小鼠骨肉瘤成骨細胞 K7M2wt

小鼠乳腺癌細胞 EMT6

小鼠海馬神經(jīng)元細胞 HT22

小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系 STC-1

小鼠乳腺上皮細胞 EpH4-Ev

小鼠肝細胞 AML12

小鼠膀胱癌細胞 MB49

小鼠巨噬細胞 Ana-1

小鼠腎小球系膜細胞 SV40-MES-13

小鼠胚胎肝細胞 BNLCL.2

小鼠肥大細胞瘤細胞 P815

小鼠腎癌細胞 Renca

小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株 G422

小鼠骨髓瘤細胞 SP2/0

小鼠精原細胞系 GC-1spg

小鼠腎髓質(zhì)細胞 mIMCD-3

小鼠前列腺癌細胞 RM-1

小鼠宮頸癌細胞 U14

小鼠卵巢癌細胞 ID8

小鼠皮下結(jié)締組織細胞 L-WRN

小鼠胰腺腺泡癌細胞 266-6

小鼠骨髓基質(zhì)細胞　 OP9

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞 MC3T3-E1

人子宮頸表皮癌細胞MS751 MS751

小鼠肝癌 H22

小鼠淋巴瘤細胞 EL4

小鼠骨樣細胞 MLO-Y4

小鼠胰島內(nèi)皮細胞 MS1

豬腎傳代細胞 IBRS-2

恒河猴胚腎細胞 FRHK-4

恒河猴腎細胞 LLC-MK2

昆蟲卵巢細胞 Sf9

科研C6/36白紋伊蚊細胞 C6/36

猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 RF/6A

雞肝癌細胞 LMH

倉鼠腎成纖維細胞 BHK-21

非洲綠猴腎細胞 VEROC1008(E6)

豬腎細胞系 PK15

牛腎細胞 MDBK

非洲綠猴腎細胞 VERO

豬睪丸細胞系 ST

貓腎細胞 CRFK

犬腎細胞 MDCK-II

恒河猴腎細胞MA-104 MA-104

絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞 B120-8

豬內(nèi)皮細胞PED PED

中國倉鼠卵巢細胞 CHO-K1

雞胚胎成纖維細胞 UMNSAH/DF-1

中國倉鼠肺細胞CHL CHL

倉鼠肺細胞 V79

豬肺泡巨噬細胞 3D4/21

中國倉鼠卵巢細胞 CHO

雞淋巴瘤細胞 DT40

猴腎細胞 MARC145

鴨子胚胎成纖維細胞 Duckembryo

中國倉鼠卵巢細胞(懸浮 CHO-S

果蠅胚胎細胞S2 S2

豬腸上皮細胞 IPEC-J2

 豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75

豬肺泡巨噬細胞 3D4/21

 豬腎細胞 PK-15